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蛋白Marker即蛋白分子量標準，是幾種已知分子量的蛋白質(zhì)的混合物，像“尺子”一樣用來指示蛋白質(zhì)條帶的大小。在WesternBlot實驗中，蛋白Marker主要是用來指示蛋白條帶所對應(yīng)的分子量大小，此外，蛋白Marker還可以用來輔助判斷蛋白轉(zhuǎn)膜是否成功或蛋白在凝膠上的電泳進度等作用，所以選擇合適的蛋白Marker也是實驗成功的重要條件之一。李記生物預染蛋白分子量標準預染蛋白在不同的緩沖體系下有不同的表觀分子量，以上2個圖片為兩種緩沖體系下的電泳示意圖。適合作為SDS-PAG...

無血清細胞凍存液的操作方法主要包括細胞的收集、離心、凍存液的加入、分裝、凍存以及后續(xù)的解凍與復蘇等步驟。以下是詳細的操作方法：一、細胞的收集與離心細胞收集：使用常規(guī)方法收集處于對數(shù)生長期的懸浮細胞或貼壁細胞。對于貼壁細胞，可以使用胰酶或EDTA等試劑進行消化，使其從培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板表面脫落，然后收集到試管或離心管中。細胞離心：將收集到的細胞懸浮液置于離心管中，進行離心處理以收集細胞沉淀。離心條件通常為1,0002,000rpm，4℃，持續(xù)35分鐘。注意，離心時應(yīng)確保溫度適宜，以...

蛋白酶K，屬于一種廣譜蛋白酶，由白色念珠菌（Candidaantarctica）發(fā)酵產(chǎn)生。它能夠在較寬的pH值范圍內(nèi)（pH4-12）保持活性，且在高溫條件下（65℃）仍能穩(wěn)定工作，這種穩(wěn)定性使蛋白酶K能夠在多種實驗條件下發(fā)揮其作用，成為科研人員手中的得力助手。在分子生物學領(lǐng)域，蛋白酶K的應(yīng)用尤為廣泛。在DNA提取過程中，蛋白酶K能夠高效地降解細胞和組織中的蛋白質(zhì)，包括那些與DNA緊密結(jié)合的組蛋白，從而釋放出純凈的DNA，為后續(xù)的PCR擴增、測序等實驗提供高質(zhì)量的DNA模板。此...

提到蛋白提取，大家不約而同會想到RIPA裂解液，裂解液加入樣品中，離心即可完成蛋白的提取。然而RIPA裂解液我們真的用對了嗎？RIPA裂解液是從動物細胞或組織中提取蛋白的常用裂解液，其工作原理是利用去污劑（表面活性劑）裂解細胞膜和核膜，從而獲取細胞和組織中的RIPA可溶性蛋白。RIPA裂解液的選擇RIPA裂解液中主要包含去污劑，緩沖體系，等滲體系，變性劑、穩(wěn)定劑等。其中去污劑是細胞裂解液中重要成分，是由疏水尾端基團和極性親水頭端基團組成的兩性分子，它們能夠降低水的表面張力，所...

蛋白質(zhì)濃度測定是用于計算純化方法的回收率的重要方法。常用的測定方法包括雙縮脲法、Lowry法、紫外吸收法、BCA蛋白濃度檢測法等。其中常用的方法就是BCA法。BCA全稱是BicinchoninicAcidAssay，也叫SmithAssay，這個方法是由PaulK.Smith發(fā)明的。這個方法通過展示不同濃度樣品的顏色變化來判斷蛋白的濃度。檢測原理BCA是一種堿性的水溶性復合物，性質(zhì)穩(wěn)定。在其提供的堿性環(huán)境下，蛋白質(zhì)可以將BCA試劑中的Cu2+還原為Cu+，Cu+繼而與BCA試...

在現(xiàn)代生物技術(shù)領(lǐng)域，DNA電泳技術(shù)已成為一種實驗手段。它廣泛應(yīng)用于基因克隆、基因突變檢測、DNA序列分析等領(lǐng)域。而DNA電泳套裝則是進行這項實驗的工具。本文將為您詳細介紹DNA電泳套裝的組成、原理及其在生物科研中的應(yīng)用。一、DNA電泳套裝的組成DNA電泳套裝主要包括以下幾部分：電泳儀：用于提供穩(wěn)定的直流電源，使DNA分子在電場作用下發(fā)生遷移。電泳槽：一般為矩形或梳子形狀，用于裝載電泳凝膠。電泳凝膠：由聚丙烯酰胺或瓊脂糖等物質(zhì)制成，是DNA分子遷移的載體。凝膠制備試劑：包括凝膠...